人参冻干粉中总皂苷测定方法研究

韩亚男 李晓怡 许永超 邹晓峰 丁爽 潘士钢

摘? 要：目的? 该文通过对人参冻干粉进行质量评价，测定人参冻干粉中总皂苷含量。方法? 采用柱层析法分离皂苷;对比不同树脂研究总皂苷含量。结果? 人参皂苷Re在40～200μg之间呈良好的线性关系（r=0.9998）。PT-大孔吸附树脂柱能够很好地吸附人参皂苷，有效地分离出人参皂苷，加样回收率为98.53%。结论? 该方法简便，准确性及灵敏性高，可以应用于人参冻干粉质量控制。

关键词：人参? 冻干粉? 总皂苷

中图分类号：R284 ? ?文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2019）10（a）-0040-02

人参（Panax ginseng C A Meycr）为五加科多年生草本植物，味甘、微苦，性温，素有“百草药”之美称，是我国传统的滋补养生名贵药材，证实人参具有改善微循环、提高组织抗缺氧能力、抑制血小板聚集、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗疲劳等多种生物活性[1]。目前市售制剂有片剂、胶囊剂、酒剂和人参茶。鲜人参不加防腐剂很难长时间保存，人参采收后通过清洗等处理后通常都会炮制，生晒、蒸制等处理来长期保存。炮制后的人参直接口服给药吸收差，口感差。

针对上述问题，该研究制备了人参冻干粉，利用冻干技术将鲜人参经工艺加工成冻干粉，保存了鲜参原有的气味、成分，吸收好、口感好。还可长时间保存，生物利用度更加高。总皂苷是评价冻干粉质量及工艺的重要指标，因此笔者研究建立了人参冻干粉中总皂苷的含量测定方法，为人参冻干粉的质量评价提供依据。

1? 仪器与试药

紫外可见分光光度计（日本岛津公司UV-2600）;Amberlite-XAD-2大孔吸附树脂（sigma）、PT大孔吸附树脂柱（河北省津杨滤材厂），人参冻干粉（自制），人参皂苷Re对照品（中国食品药品检定研究院）;试剂均为分析纯。

2? 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

取该品20支，取内容物置自封袋中，展研细，精密称取0.2g左右的试样，置于100mL量瓶中，加少量水，超声30min，再用水定容至100mL，摇匀，放置，吸取上清液1.0mL进行柱层析。

2.2 柱层析

以PT-大孔吸附树脂柱进行层析分离。先用25mL70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25mL水洗柱，棄去洗脱液，精确加入1.0mL已处理好的试样溶液，用25mL水洗柱，弃去洗脱液，用25mL70%乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60℃水浴挥干。

2.3 标准曲线的绘制

称取人参皂苷Re对照品20mg置容量瓶中，加甲醇溶解并定容至10mL，分别精密量取标准溶液：20、40、60、80、100μL于蒸发皿中，放在水浴挥干（60℃），蒸发皿中准确加入0.2mL5%香草醛冰醋酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶液，再加0.8mL高氯酸，混匀后移入5mL带塞刻度离心管中，60℃水浴上加热10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰醋酸5.0mL，摇匀后，以1cm比色池于560nm波长处比色测定。并分别记录各吸光值，以吸光值A对质量C绘制标准曲线。回归方程为A=0.0044C-0.0009（r=0.9998），结果：人参皂苷Re在40～200μg之间呈良好的线性关系。

2.4 回收率试验

采用加样回收法，取本品，一式9份，分别按样品总皂苷量的80%、100%、120%精密加入人参皂苷Re对照品，按供试品制备方法进行含量测定并计算回收率，经统计处理，平均回收率为：98.53%，RSD分别为1.21%。

2.5 不同树脂对总皂苷含量的影响考察

分别采用PT-大孔吸附树脂柱和Amberlite-XAD-2大孔吸附树脂吸附总皂苷，然后用洗脱液洗脱，收集洗脱液 [2-3]测定含量。结果表明，采用PT-大孔吸附树脂柱时总皂苷含量比采用Amberlite-XAD-2大孔吸附树脂柱时高。说明采用Amberlite-XAD-2大孔吸附树脂柱时，有部分皂苷被水洗脱掉了，会使总皂苷的测定含量降低，因此，采用PT-大孔吸附树脂柱。结果见表1、表2。

3? 讨论

《保健食品检验与评价技术规范》2003年版中“二十三.保健食品中总皂苷的测定”用的Amberlite-XAD-2大孔吸附树脂对皂苷的吸附性比较差，结果重现性不好，准确性不好。采用PT-大孔吸附树脂柱对皂苷的吸附性好，重现性、准确性良好。可能与人参中的皂苷种类、苷元不同等有关，有待进一步研究。

参考文献

[1] 吕建平，郝冠中.人参抗疲劳作用研究进展[J].中国社区（医学专业），2012，14（34）：43.

[2] 刘花梅，杜裕芳，邹敏，等.保健食品中总皂苷测定方法研究[J].安徽农业科学，2018，46（15）：163-166.

[3] 白鸿.保健食品功效成分检测方法[M].北京：中国中医药出版社，2011.

编辑整理：科学技术创新杂志社编辑部 官方网站：www.hljkxzzs.com